你已经得到了这株菌是吗？形态，生理生化结合分子生物学鉴定即可。如果没有形态分类学基础，可以直接先做分子鉴定，比对后看大概属于哪个种后再详细分析。分子鉴定步骤：1.液体培养细菌，一般条件37度24小时即可。2.菌液PCR。扩增16SrDNA序列，所用引物网上都有，查到后，将序列发送生物公司合成。pcr反应条件网上也都有。3.测序。扩增得到的序列送生物公司测序，NCBI上比对，即可。
8. TA质粒转化菌落的验证 与表达载体的验证不同，转化TA质粒时不用双酶切验证。只需用目的基因引物和TA载体引物PCR验证即可。TA载体引物PCR片段比插入片段大约长150bp。 目的基因退火温度与之前胶回收时温度相同，TA退火温度60C即可，但可在55～70之间变动，不会影响结果。 挑取至少6个白色克隆于6个含4ml抗性的LB培养基的灭菌试管中37C过夜摇菌。 取摇约2h时的菌
首先，TA 克隆是用于 PCR 产物的克隆和测序。原理是利用 Taq 酶能够在 PCR 产物的 3’末端 加上一个非模板依赖的 A，而 T 载体是一种带有 3’T 突出端的载体，在连接酶作用下，可以快速地、一步到位地把 PCR 产物直接插入到质粒载体的多克隆位点中。
那么在你做 TA 克隆时，需要准备的前期工作是什么呢？
1 、设计引物 P 出你的目的基因
不管你是手动设计还是软件