求问各位大佬,我用液相分析氨基酸,使用了OPA衍生剂,准确称取50 mg的OPA,溶于0.5 mL的甲醇,加入4.5 mL的0.4 M的硼酸-硼砂缓冲液(pH 9.5),最后加入0.25 mL的β-巯基乙醇,衍生剂过了0.22微米的有机膜,但是每分析一个样,柱压就会升高2——3bar。已经排除是其他原因,就是出现在OPA衍生剂上面。请求为什么会这样?以及该如何解决?
油脂水解产物中游离脂肪酸的检测主要利用气相色谱法, 但预处理步骤较为繁琐, 需要通过改变水解产物pH 值或利用薄层色谱预先将游离脂肪酸分离。柱前衍生HPLC 法测定游离脂肪酸不需要分离游离脂肪酸的前处理, 且HPLC 检测分离温度较低, 脂肪酸热降解程度大大降低, 具有气相色谱法无可比拟的优越性而得到了广泛的应用。利用柱前衍生HPLC 法测脂肪水解产物中游离脂肪酸的研究国外已有论文发表 。
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