人工染色体克隆载体实际上是一种穿梭克隆载体,含有质粒克隆载体所必备的第一受体(大肠杆菌)源质粒复制起始位点,还含有第二受体(如酵母菌)染色体DNA着丝点、端粒和复制起始位点的序列,以及合适的选择标记基因。这样的克隆载体在第一受体细胞内可以按质粒复制形式进行高拷贝复制,在体外与目的DNA片段重组后,转化第二受体细胞。
可在转化的细胞内按染色体DNA复制的形式进行复制和传递,筛选第一受体的克隆子,
实验方法原理
实验材料 质粒 DNA酵母株
试剂、试剂盒 10 cm 完全极限(CM) 缺失成分培养基平板YPD 平板 X-gal 平板
仪器、耗材 30℃ 培养箱
实验步骤
实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」
1. 用乙酸锂转化法将单个肽适配体捕获质粒与对照质粒(pJG4-5)转化人 EGY48 (Mata)。在 10 cm Glu/CM-Trp 平板上筛选转化株。
2. 用单独的靶蛋白诱饵
基于稀土KGdF4纳米颗粒的光磁多模生物标记材料
稀土掺杂无机纳米晶由于其高光化学稳定性、生物兼容性、长荧光寿命和可调谐荧光发射波长等优点,有望成为替代分子探针的新一代荧光生物标记材料。另一方面,钆离子由于其次外层7个单电子而被广泛用于磁共振成像造影剂。如果将当前最常见的光学检测和磁共振成像功能集成于同一纳米颗粒,则可实现高灵敏、低剂量生物体内的癌症细胞成像、肿瘤早期诊疗以及在DNA测序等领域
分享