ECL显影

wb免疫印迹法的主要显色方法有哪些

  Western免疫印迹(WesternBlot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。

  western显色的方法主要有以下几种:

  i.放射自显影

  ii.底物化学发光ECL

  iii.底物荧光ECF

  iv.底物DAB呈色

  现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色,体同水平和实验条件的是用

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细胞凋亡中Caspase-3活性的检测

           

实验方法原理 Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17K

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ECL Plus超敏发光液使用方法

1、常规电泳、转膜、HRP 标记抗体或核酸探针孵育、洗膜。注意用 HRP 标记 IgG 或用一抗-链亲和素 -生物素-HRP 夹心法。核酸杂交膜用 HRP 标记探针杂交,洗膜。

2、在洗涤膜上的 HRP 标记二抗的同时,新鲜配制发光工作液:分别取等体积的溶液 A 和 B 混合,放 置使之恢复室温否则会减弱荧光强度。建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有减低。

3、用镊子取出膜,搭在滤纸

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