磷酸化位点

想检测磷酸化的蛋白,这个磷酸的位点,怎么选择

每个蛋白质磷酸化的位点各异,有的不止有一个磷酸化位点,有的在不同位点磷酸化以后获得的功能也会不同。楼主要选择的,大概是检测时所用的抗体能够识别哪个磷酸化位点的epitope。如果有相关文献表示某个磷酸化位点同楼主所感兴趣的该蛋白功能相关的话,可以据此选择。如果这些信息仍然未知,楼主只好使用较为常见的抗体。

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蛋白质磷酸化位点怎么确定

鉴定了磷酸化肽后,还要进一步确定磷酸化肽中修饰了磷酸化位点的哪个残基.用于确定磷酸化肽中磷酸化位点的质谱方法基于两种不同原理,第一种方法取决于磷酸酯键的化学稳定性,如在ESI质谱仪的碰撞室或离子源中,或在MALDI-MS的PSD过程中.磷酸化肽可通过磷酸酯键断裂产生的碎片离子鉴定.第二种方法基于肽段增加的磷酸酯基团的质量数.假如蛋白是已知的,可通过质量数来确定肽段.在某些情况下,肽段只含有一个丝氨酸

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想检测磷酸化的蛋白,这个磷酸的位点,怎么选择

每个蛋白质磷酸化的位点各异,有的不止有一个磷酸化位点,有的在不同位点磷酸化以后获得的功能也会不同。楼主要选择的,大概是检测时所用的抗体能够识别哪个磷酸化位点的epitope。如果有相关文献表示某个磷酸化位点同楼主所感兴趣的该蛋白功能相关的话,可以据此选择。如果这些信息仍然未知,楼主只好使用较为常见的抗体。

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为什么蛋白质保守丝氨酸位点是其磷酸化位点

磷酸化位点一般有丝氨酸,苏氨酸,酪氨酸。其中,丝氨酸和苏氨酸是最常见的磷酸化位点,因为其结构末端含有羟基,羟基很活泼,可以与磷酸基团结合。磷酸化的过程就是传递磷酸基团。所以说,蛋白质中如果某个丝氨酸很保守的话,很大程度上就是磷酸化位点。

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